1 Aperçu du génie génétique 1
1.1 Qu'est-ce que le génie génétique ? 2
1.2 Naissance et développement du génie génétique 3
1.3 Applications du génie génétique 4
Lecture 1-1 La vitesse du développement de la biotechnologie 9
Lectures 1-2 : La naissance de la vie artificielle et sa signification 10
Résumé 11
Problème d'organisation 11
Référence 12
2 Structure et expression des gènes 14
2.1 La nature des gènes 16
Théorie chromosomique 16
L'ADN comme matériel génétique 16
1) Expérience de transformation (Griffith, 1928) 17
2) Expériences de transformation in vitro
(1944, Avery, McLeod, McCarty) 18
3) Expérience du mélangeur (1952, Hershey, Chase) 18
2.2 Structure chimique des acides nucléiques 19
Composants des acides nucléiques 19
Loi de Chargaff 20
Expérience de diffraction des rayons X 21
Structure de la double hélice d'ADN 21
1) Double hélice 22
2) La signification de la double hélice 22
Élucidation de la réplication semi-conservative de l'ADN 24
2.3 Expression et régulation des gènes 25
Gènes et protéines 25
Théorie 1 gène 1 enzyme 27
Principe central de l'information génétique 27
Structure du gène 27
1) Structure des gènes procaryotes 27
2) Structure des gènes eucaryotes 28
Expression génique 29
1) Guerrier 29
2) Traduction 31
Régulation de l'expression génique 33
1) Régulation des étapes de transcription chez les procaryotes 33
2) Régulation de l'expression des gènes chez les eucaryotes 37
Lecture 2-1 : Site de découverte historique 26
Lecture 2-2 RNA World 39
Résumé 40
Problème d'organisation 40
Référence 41
3 Propriétés et séparation des acides nucléiques 42
3.1 Propriétés des acides nucléiques 44
Dénaturation et régénération de l'ADN 44
Hybridation 45
Stabilité de l'ADN et de l'ARN 45
3.2 Isolement et purification des acides nucléiques 48
Isolement de l'ADN plasmidique 48
Isolement de l'ADN génomique à partir de cellules 50
1) Isolement de l'ADN génomique à partir de cellules bactériennes 50
2) Isolement de l'ADN génomique à partir de cellules animales 50
3) Isolement de l'ADN génomique à partir de cellules végétales 51
Isolement de l'ADN du phage 52
Isolement de l'ARN 52
1) Informations générales sur l'isolement de l'ARN 52
2) Contamination et élimination par la RNase 52
3) Méthode d'isolement de l'ARN total 53
Isolement de l'ARNm 54
Précipitation et stockage des acides nucléiques 54
Mesure de la concentration en acides nucléiques 56
Lecture 3-1 RNase, une enzyme très stable 46
Lecture 3-2 : ADN ancien et stabilité de l’ADN 47
Résumé 57
Problème d'organisation 58
Référence 58
4 Enzymes et électrophorèse 60
4.1 Enzymes nécessaires à la manipulation et à l'analyse génétiques 62
Nucléase 62
1) ADN terminase 62
2) Endonucléase d'ADN 64
3) Enzyme de dégradation de l'ARN 65
4) Enzyme de restriction 65
5) Système de nucléase pour l'édition du génome -
Ciseaux Gène 68
polymérase 72
1) Polymérase utilisant l'ADN comme matrice (ADN polymérase) 76
2) ADN polymérase (transcriptase inverse) utilisant l'ARN comme matrice 77
3) Désoxynucléotide transférase terminale 78
ADN ligase 78
Action de la ligase d'ADN 78
Enzyme de modification de l'ADN 78
1) Phosphorylase et enzyme de déphosphorylation 78
2) ADN méthyltransférase 79
Protéinase K : Protéinase 80
Autres enzymes 80
1) Lysozyme 80
2) Agarase 80
4.2 Électrophorèse 81
Qu'est-ce que l'électrophorèse ? 81
Électrophorèse sur gel d'agarose 81
1) Gel d'agarose 81
2) Coloration et visualisation de l'ADN dans un gel d'agarose 82
3) Lors de l'électrophorèse sur gel d'agarose
Facteurs affectant le mouvement des acides nucléiques 82
4) Le processus complet d'électrophorèse sur gel d'agarose 83
5) Électrophorèse multifacette 83
Électrophorèse sur gel de polyacrylamide 85
Utilisations de l'électrophorèse 85
Lecture 4-1 : Découverte des enzymes de restriction et des réactions de restriction 69
Lecture 4-2 : Découverte et application du système CRISPR/Cas 73
Lecture 4-3 Migration de l'ADN plasmidique sur un gel d'agarose 84
Résumé 87
Problème d'organisation 88
Référence 88
5 vecteurs 90
5.1 Qu'est-ce qu'un vecteur ? 92
5.2 Types de vecteurs 92
5.3 Clonage bactérien et vecteurs d'expression 92
Vecteur plasmidique 93
1) Structure et caractéristiques des vecteurs plasmidiques 93
2) Types de vecteurs plasmidiques représentatifs 94
Vecteur bactériophage 95
Vecteur du bactériophage λ 95
Cosmid Vector 105
Chromosome artificiel bactérien 105
5.4 Levure Vector 107
Vecteur plasmidique de levure 107
1) Vecteur YEP 107
2) Autres vecteurs plasmidiques de levure 108
Chromosome artificiel de levure 109
5.5 Vecteur animal 110
5.6 Vecteur végétal 111
Lecture 5-1 Méthodes de réplication de l'ADN 100
Lecture 5-2 : La découverte des plasmides et le génie génétique 111
Résumé 112
Problème d'organisation 112
Référence 113
6 Production d'ADN recombinant et
Introduction et confirmation dans les cellules 114
6.1 ADN recombinant 116
Production de molécules d'ADN recombinant par des enzymes de restriction 116
1) Production de molécules d'ADN recombinant à l'aide de vecteurs plasmidiques 116
2) Production de molécules d'ADN recombinant à l'aide de vecteurs phagiques 118
Production de molécules d'ADN recombinant à partir de produits PCR 118
1) PCR (réaction en chaîne par polymérase) 118
2) Clonage des produits PCR 118
Production de molécules recombinantes à l'aide de systèmes de recombinaison homologue 122
1) Principe 122
2) Processus de clonage et caractéristiques 123
6.2 Introduction de gènes dans E. coli 124
Transformation 124
1) Utilisation de la transformation 124
2) Cellules réactives et processus de transformation 125
Introduction de bactériophages dans les cellules 127
1) Transfection 127
2) Infection bactérienne après assemblage in vitro 128
6.3 Sélection des cellules transformées 128
Identification de vecteurs plasmidiques recombinants 128
1) Sélection par les antibiotiques 128
2) Insertion de LacZ (β-galactosidase)
Sélection par inactivation 131
3) Sélection par PCR 132
Identification de vecteurs de phages recombinants 133
1) Sélection basée sur la taille du génome du phage λ 133
2) Sélection par inactivation insertionnelle du gène LacZ 133
3) Sélection par inactivation insertionnelle du gène λcI 133
4) Sélection par phénotype Spi 133
En désactivant l'insertion S up4
Identification de YAC recombinants 133
6.4 L'ensemble du processus de la technologie de l'ADN recombinant 135
Lecture 6-1 Le premier vecteur plasmidique recombinant 136
Lecture 6-2 Modifications de la membrane cellulaire lors de l'électroporation 137
Résumé 138
Problème d'organisation 138
Référence 139
7 Acquisition de gènes 140
7.1 Clonage de gènes 142
7.2 Préparation de la banque génétique 142
Isolement du gène 143
1) Séparation du génome 143
2) Isolement de l'ADNc 143
Insérer 144 dans le vecteur
1) Insertion de l'ADNc dans le vecteur 144
2) Insertion de l'ADN génomique dans le vecteur 144
Exemple 144 de fabrication de bibliothèques
145 éléments à prendre en compte lors de la création d'une bibliothèque
7.3 Méthodes de dépistage 147
Dépistage par hybridation 147
Sonde 147
Dépistage par liaison d'anticorps 153
Dépistage basé sur les différences d'expression 153
Criblage par liaison protéique 153
1) Méthode de double hybride de levure 153
2) Méthode de présentation de phages 157
Dépistage utilisant les fonctionnalités 158
7.4 Réaction en chaîne par polymérase 160
Aperçu de la PCR 160
Applications de la PCR 160
Enzyme PCR 161
Optimisation des conditions de PCR 161
Limites de la méthode PCR 164
PCR en temps réel 164
Lecture 7-1 Séparation des fragments d'ADN génomique à partir de gels d'agarose 146
Lecture 7-2 Radio-isotopes couramment utilisés dans les expériences 149
Lecture 7-3 Clonage par la fonction chez la levure 159
Lecture 7-4 L'invention de la méthode PCR 163
Résumé 164
Problème d'organisation 165
Référence 165
8 Analyse et diagnostic génétiques 166
8.1 Analyse génétique 168
Analyse de la structure des gènes 168
1) Cartographie par enzymes de restriction 168
2) Analyse par Southern blot 169
3) Comment vérifier le point de départ du transfert 170
4) Méthode d'identification des limites exon-intron 172
Séquençage de l'ADN 172
1) Méthode de terminaison de chaîne 173
2) Méthode de décomposition chimique 173
3) Méthode automatisée de détermination de la séquence de base 175
4) Séquençage de nouvelle génération 176
5) Méthode d'amplification de l'ADN 177
6) Méthode de détermination de la séquence de bases de l'ADN 178
7) Méthode de détermination de la séquence de base de 3e génération 182
8.2 Tests génétiques 185
Tests génétiques pour le diagnostic des maladies 185
Méthodes de diagnostic génétique 186
1) Diagnostic génétique utilisant le polymorphisme de longueur des fragments de restriction 186
2) Diagnostic génétique utilisant des séquences répétées en tandem courtes (STR) 188
3) Utilisation d'oligonucléotides spécifiques d'allèles
Diagnostic génétique 189
4) Technologie des puces à ADN 189
5) Méthode de détermination de la séquence de base 190
6) Diagnostic génétique utilisant des polymorphismes nucléotidiques simples (SNP) 190
Identification personnelle 192
Résumé 194
Problème d'organisation 194
Référence 195
9 Analyse du génome et génomique 196
9.1 Analyse de la séquence du génome 198
Cartographie du génome 198
1) Cartographie cytologique 198
2) Carte génétique 200
3) Cartographie physique 202
Stratégie de séquençage du génome 204
1) Méthode du fusil de chasse 204
2) Méthode des contigs 205
3) Méthode hiérarchique du fusil de chasse 205
Projet génome 206
1) Projet Génome Humain : 1990–2003 206
2) Analyse du génome entier : Consortium T2T 208
9.2 Informations sur la séquence du génome 209
Génome d'E. coli 209
1) Gène codant pour une protéine 209
2) Séquence répétée non transcrite 209
3) Autres 209
Génome humain 209
1) Gène codant pour une protéine 211
2) Duplication segmentaire 211
3) Répéter la séquence 211
9.3 Annotation du génome 213
Prédiction génétique 214
1) Prédiction par caractéristiques générales 214
2) Prédiction de gènes basée sur l'homologie 215
Identification des gènes et des régions régulatrices des gènes 216
1) Région de contrôle du gène 217
2) Modification de l'histone 218
3) Méthode ChIP-seq 219
4) Méthode DNase-seq 220
5) Méthode de capture de la structure chromosomique 221
Analyse de la fonction des gènes 222
1) Méthode utilisant la recherche d'homologie 222
2) Analyse de la localisation de l'expression 222
3) Analyse du contrôle de l'expression 223
Annotation du génome d'Escherichia coli 225
Annotation du génome humain 226
9.4 Génomique et applications de l'information génomique 229
Aperçu de la génomique 230
Épigénomique 231
Métagénomique 233
Applications de l'information génomique 234
1) Analyse de la variation génétique et applications 234
2) Analyse et applications des mutations du génome du cancer 236
Lire 9-1 Plus, plus vite, moins cher 239
Résumé 241
Problème d'organisation 242
Référence 242
10 Analyse et contrôle de la transcription 244
10.1 Analyse des régions régulatrices transcriptionnelles 246
Analyse de retard sur gel 246
Analyse de l'empreinte DNase I 246
Analyse du journaliste 247
1) Analyse à l'aide du CAT 248
2) Méthode d'analyse utilisant Luc 248
3) Analyse utilisant GFP 249
4) Applications de l'analyse des rapporteurs 250
10.2 Analyse des transcriptions 250
Analyse Northern blot 250
Test de protection à la RNase 251
RT-PCR 251
1) Principes de la PCR en temps réel 252
2) Quantification de l'ADN par PCR en temps réel 254
3) Applications de la PCR en temps réel 254
Analyse de séquences d'ARN 255
10.3 Analyse du transcriptome 255
Analyse par microréseau d'ADN 255
1) Fabrication de plaques de microarrays d'ADN 256
2) Principes des expériences sur les puces à ADN 257
3) Utilisation des puces à ADN 257
Analyse de séquences d'ARN 259
1) Séquençage d'ARN à grande échelle 259
2) Analyse de l'ARN unicellulaire 262
3) Analyse spatiale des séquences d'ARN 263
Analyse du transcriptome épigénétique 265
10.4 Contrôle des processus transcriptionnels et post-transcriptionnels 265
ARN antisens 267
Oligonucléotide antisens 268
Interférence ARN 272
1) Petit ARN interférent 272
2) MicroARN 274
Contrôle par le système CRISPR 277
1) Répression transcriptionnelle par le système CRISPR 277
2) Stimulation de la transcription à l'aide de CRISPR 278
Lecture 10-1 Projet d'expression génotypique et tissulaire 260
Lecture 10-2 Développement de systèmes d'administration thérapeutique d'acides nucléiques 270
Résumé 279
Problème d'organisation 280
Référence 281
11 Isolement et analyse des protéines 282
11.1 Production de protéines 284
11.2 Séparation des protéines 285
Méthode de précipitation par changement de solubilité : relargage salin 285
Dialyse et ultrafiltration 285
1) Dialyse 285
2) Ultrafiltration 286
Chromatographie 286
1) Chromatographie par échange d'ions 287
2) Chromatographie de filtration sur gel 288
3) Chromatographie d'interaction hydrophobe 288
4) Chromatographie d'affinité 288
5) Chromatographie liquide à haute pression 289
11.3 Identification des protéines 289
FDS-PAGE 290
Focalisation isoélectrique 292
Électrophorèse bidimensionnelle 293
Immunodétection 294
1) ELISA 294
2) Analyse par Western blot 297
Spectrométrie de masse 297
Configuration du spectromètre de masse 298
Empreintes peptidiques de masse et
Analyse partielle de la séquence d'acides aminés 300
Méthode d'analyse de la séquence d'acides aminés terminaux des protéines 302
1) Méthode de décomposition d'Edman 302
2) Analyse de la séquence d'acides aminés en phase gazeuse 303
11.4 Analyse de la liaison aux protéines 304
Test de type ELISA 304
Méthode de précipitation des protéines marquées 305
Coimmunoprécipitation 306
Méthode d'analyse SPR 306
11.5 Protéome et protéomique 307
Analyse structurale des protéomes 308
Analyse de l'expression du protéome 308
1) Méthode de marquage in vivo 309
2) Méthode de marquage in vitro 309
Analyse fonctionnelle des protéomes 310
Lecture 11-1 Analyse du flux latéral 294
Lecture 11-2 : Koichi Tanaka, lauréat salarié du prix Nobel 311
Résumé 312
Problème d'organisation 313
Référence 313
12 Bioinformatique 314
12.1 Qu'est-ce que la bioinformatique ? 316
Origines et développement de la bioinformatique 316
Évolution des bases de données de séquences 318
Omics et bioinformatique 318
12.2 Principales bases de données bioinformatiques 319
GenBank 319
RefSeq 320
12.3 L'importance des bases de données de séquences dans la recherche biologique 321
12.4 Format des données de séquence 321
Format FASTA 321
Format de fichier plat GenBank 322
12.5 Utilisation du système de recherche d'informations 324
12.6 Alignement de séquences 327
Les implications de la similarité de séquence 327
Algorithme d'alignement de séquences 327
Homologie et similarité 327
Détermination d'homologie 328
Gènes orthologues et homologues 329
Matrice de substitution utilisée dans l'alignement de séquences 329
12.7 Utilisation du programme de recherche de séquences (BLAST) 331
12.8 Utilisation du programme d'alignement multiple (ClustalW) 334
12.9 Recherche intégrée d'informations génétiques
(Navigateur génomique UCSC) 335
12.10 Exploration génétique 338
12.11 Analyse de données multi-omiques 338
Données multi-omiques 338
Méthode d'analyse de données multi-omiques 340
Lecture 12-1 DB Journey dans Entrez 327
Lecture 12-2 Classification des algorithmes d'alignement de séquences 328
Lecture 12-3 Matrice de substitution utilisée dans l'alignement de séquences :
Matrice PAM et matrice BLOSUM 330
Résumé 341
Problème d'organisation 342
Référence 342
13 Génie des protéines 344
13.1 Qu'est-ce que l'ingénierie des protéines ? 346
13.2 D'après les informations sur la structure des protéines
Génie des protéines 346
Méthode : Mutagenèse dirigée 346
1) Méthode 346 utilisant l'ADN simple brin M13
2) Mutagenèse par PCR 347
Étude de cas : Amélioration de la fonction protéique 348
1) Amélioration de la stabilité thermique des enzymes industrielles 349
2) Activité accrue des protéines recombinantes 349
3) Augmentation de la durée d'efficacité de la protéine thérapeutique de 350
13.3 Ingénierie des protéines par évolution dirigée 350
Méthode : Mutagenèse aléatoire 351
1) Mutagenèse par cassette 352
2) PCR à l'origine d'erreurs 352
3) Mélange d'ADN 354
Étude de cas : Amélioration de la fonction protéique 354
1) Augmentation de l'activité enzymatique 354
2) Production de protéines aux nouvelles fonctions 355
13.4 Ingénierie des anticorps 358
Structure de l'IgG 358
1) Structure de l'IgG 358
2) Processus de formation de la diversité et de l'affinité des IgG 359
Anticorps monoclonal 362
1) Principe de production des anticorps monoclonaux 362
2) Procédé de production d'anticorps monoclonaux 363
3) Applications des anticorps monoclonaux 364
Anticorps thérapeutique 365
1) Anticorps chimérique (anticorps monoclonal chimérique humain-souris) 366
2) Anticorps humanisé 366
3) Anticorps humain 368
Thérapie par anticorps modifiée 372
1) Conjugué anticorps-médicament 372
2) Radioimmunoconjugué 373
3) Fragment d'anticorps 374
4) Anticorps bispécifique 375
5) Cytokine immunitaire 377
13.5 Protéines analogues : aptamère peptidique 378
Adnectine 379
Préparation d'une bibliothèque d'aptamères peptidiques 379
Criblage d'aptamères peptidiques 379
1) Méthode de criblage in vivo 380
2) Affichage in vitro 380
13.6 Production et isolement de protéines recombinantes 382
Aperçu des procédés de production de protéines recombinantes 382
Culture cellulaire et production de protéines 383
1) Procédé de séparation cellulaire 384
2) Processus de rupture cellulaire 384
3) Procédé de filtration 385
4) Procédé de séparation et de purification 386
5) Processus de produit fini 387
Lecture 13-1 Développement de la protéine fluorescente rouge 356
Lecture 13-2 : Développement par Milstein de la technologie de fabrication des anticorps monoclonaux 378
Résumé 387
Problème d'organisation 388
Référence 389
14 Génie génétique microbien 390
14.1 Caractéristiques des micro-organismes en tant que matériaux pour le génie génétique 392
14.2 Expression des gènes d'intérêt chez les micro-organismes 392
Expression des gènes d'intérêt chez E. coli 393
1) promoteur lac 393
2) promoteur tac 394
3) promoteur trp 394
4) Promoteur PL/PR 395
5) Système d'expression T7 395
Expression du transgène chez la levure 397
1) Expression de transgènes dans la levure de boulanger 397
2) Expression des gènes introduits chez Pichia 398
14.3 Optimisation de l'expression génique 399
Guerrier Niveau 399
1) Origine de réplication 399
3) Insérer le site de terminaison de la transcription 400
Étape de traduction 400
1) Utilisation des codons génétiques 400
2) Site de liaison du ribosome 400
3) Codon stop de traduction 400
Étape de post-traduction 400
1) Solubilité des protéines dans l'eau 400
2) Minimiser la dégradation des protéines 401
14.4 Expression de la protéine de fusion 401
Types de partenaires de fusion 401
1) Étiquette histidine 402
2) Glutathion S-transférase (GST) 402
Fusion Partner's Cut 402
14.5 Intégration chromosomique des gènes et
Suppression du marqueur de sélection 403
Intégration chromosomique des gènes 403
Supprimer le marqueur de sélection 404
14.6 Applications des micro-organismes transgéniques 406
Médecine 406
Industrie 407
1) Production de substances utiles de faible poids moléculaire 407
2) Production de matériaux polymères utiles 408
Agriculture 409
1) Pesticide microbien 409
2) Micro-organismes favorisant la croissance des plantes 411
Environnement 411
14.7 Amélioration de la productivité 411
Ingénierie ambassadrice 412
Ingénierie métabolique des systèmes 413
Lecture 14-1 : Recombinaison spécifique à la position 405
Résumé 415
Problème d'organisation 416
Référence 416
15 Génie génétique animal 418
15.1 Les animaux en tant que matériel génétiquement modifié
Caractéristiques des cellules animales 420
15.2 Vecteur d'expression cellulaire animale 420
Caractéristiques des vecteurs d'expression 420
Promoteur 421
1) Promoteur de base 421
2) Promoteur persistant 422
3) Promoteur spécifique du tissu 422
4) Promoteur réglementaire 422
Marqueur de sélection 424
Vecteur à usage spécial 426
1) Vecteur 426 pour l'expression de l'hétérodimère
2) Vecteur d'expression épisomal 426
3) Vecteur d'expression de cellules d'insectes 427
15.3 Méthode d'introduction du gène 429
Méthode d'introduction physique 430
1) Électroporation 430
2) Méthode de micro-injection 430
Méthode d'introduction chimique 430
1) Méthode de transfection 430 médiée par le phosphate de calcium
2) Méthode des liposomes 430
Méthode d'introduction biologique 430
1) Méthode d'introduction utilisant des virus 431
2) Méthode de fusion de sphéroplastes de levure 431
15.4 Édition du génome 432
Recombinaison homologue 433
Éditeur de génome 433
1) Éditeur de génome CRISPR 435
2) Développement de l'éditeur de base CRISPR 436
15.5 Méthodes de transgénèse animale 439
Méthode de micro-injection d'embryons 440
Méthode de transformation des cellules souches embryonnaires 441
Production de souris génétiquement modifiées 441
Méthode de transfert nucléaire de cellules somatiques 446
15.6 Applications du génie génétique animal 448
Modèle animal de maladie humaine 448
Production de protéines pharmaceutiques Animaux 449
450 animaux xénogéniques destinés à la production d'organes
Lecture 15-1 Arc-en-ciel cérébral 444
Lecture 15-2 Dolly la brebis clone 447
Résumé 452
Problème 453
Référence 454
16 Génie génétique végétal 456
16.1 Caractéristiques des plantes en tant que matériel pour le génie génétique 458
16.2 Méthodes de transformation des plantes 458
Transformation végétale et culture de tissus 458
Diverses méthodes de transformation des plantes 458
1) Méthode utilisant Agrobacterium 460
2) Méthode d'insertion directe d'ADN dans les cellules végétales 467
3) Fusion cellulaire à l'aide de protoplastes 469
4) Transformation in planta 470
5) Transformation des chloroplastes 472
6) Méthode de transformation des plantes par des virus 474
16.3 Vérification des transformants 475
Vérification de la résistance des matériaux marqueurs de sélection 475
Insertion du gène introduit 475
L'expression (transcription) du gène introduit est-elle confirmée ? 475
Identification du produit protéique du gène introduit 475
Tests de fonction physiologique des transformants 476
16.4 Applications du génie génétique végétal 476
Applications des plantes transgéniques 476
Développement de plantes résistantes aux catastrophes 476
1) Plantes résistantes aux ravageurs 476
2) Plantes résistantes aux virus 478
3) Plantes résistantes aux pathogènes 478
4) Plantes résistantes aux stress environnementaux défavorables 478
5) Cultures résistantes aux herbicides 478
Amélioration de la qualité, augmentation du rendement et plantes fonctionnelles 479
Vaccin oral 482
Réacteur de l'usine 483
Perspectives du génie génétique végétal 484
Lecture de l'ADN-T 16-1 dans le génome de la plante
Processus d'insertion 462
Lecture 16-2 477 Avant le développement des cultures Bt
Lecture 16-3 Les premiers aliments génétiquement modifiés
Développement et échec de la tomate Flavr Savr™ 481
Lecture 16-4 Utilisation du système d'édition CRISPR/Cas
Développement des cultures 486
Pommes GM non brunes Reading 16-5 487
Lecture 16-6 Plante génétiquement modifiée 488 comme substitut de lampe électroluminescente
Pour en savoir plus : 16-1 Restauration environnementale par les plantes 489
Pour en savoir plus, consultez la page 16-2 Bioénergie 491
Résumé 492
Problème 492
Référence 493
17 Applications médicales du génie génétique 494
17.1 Produits biopharmaceutiques 496
Thérapie par anticorps 496
Protéines recombinantes thérapeutiques 498
Vaccin protéique recombinant 499
Thérapeutiques à base d'acides nucléiques 500
1) Oligonucléotide antisens 502
2) Petit ARN interférent 502
3) Aptamère 503
4) Vaccin à ARNm 504
17.2 Thérapie génique 506
Approches multiples de la thérapie génique 506
Tissu cible pour la thérapie génique 507
Thérapie génique utilisant des vecteurs viraux 507
1) Système de vecteur rétroviral 508
2) Système de vecteur adénovirus 511
3) Virus adéno-associé 512
Étude de cas 513 sur la thérapie génique
17.3 Immunothérapie du cancer 515
Inhibition du point de contrôle immunitaire 515
1) CTLA-4 516
2) PD-1/PD-L1 516
Thérapie par cellules CAR-T 517
Vaccin anticancéreux personnalisé 518
Lecture 17-1 : Biosimilaires et bio-améliorés 501
Lecture 17-2 : Traitement personnalisé du cancer 519
Résumé 521
Problème d'organisation 521
Référence 522
Annexe 1 : Introduction aux sites Web utiles en bioinformatique 523
Annexe 2 Utilisation du programme d'analyse génétique
Recherche de sites de restriction enzymatique dans les gènes 524
Glossaire 526
Recherche (coréen/anglais) 536