Manuel de laboratoire de biochimie et de biologie moléculaire
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Description
Introduction au livre
Le domaine des sciences de la vie est particulièrement expérimental, et sans expériences, il est impossible d'élucider les mystères des phénomènes vitaux.
Même si vous réalisez la même expérience, si vous la faites en la comprenant, vous êtes un scientifique. Si vous la faites sans la comprendre ou sans réfléchir, vous n'êtes pas un scientifique, mais un simple assistant d'expérience.
Le « Manuel de laboratoire de biochimie et de biologie moléculaire » est un ouvrage qui contient autant de contenu expérimental avancé que possible au niveau licence en biochimie et biologie moléculaire, qui sont des matières expérimentales majeures dans les sciences de la vie, et qui est conçu pour être facilement compréhensible.
La section Introduction, au début de chaque chapitre, fournit une explication relativement détaillée permettant aux étudiants de comprendre d'abord le contenu, puis de mener des expériences.
Chaque chapitre est associé à une vidéo et un laboratoire virtuel est mis en place, vous permettant ainsi de réaliser des expériences tout en regardant la vidéo.
De plus, les questions et références à la fin de chaque chapitre permettent une étude plus approfondie.
Même si vous réalisez la même expérience, si vous la faites en la comprenant, vous êtes un scientifique. Si vous la faites sans la comprendre ou sans réfléchir, vous n'êtes pas un scientifique, mais un simple assistant d'expérience.
Le « Manuel de laboratoire de biochimie et de biologie moléculaire » est un ouvrage qui contient autant de contenu expérimental avancé que possible au niveau licence en biochimie et biologie moléculaire, qui sont des matières expérimentales majeures dans les sciences de la vie, et qui est conçu pour être facilement compréhensible.
La section Introduction, au début de chaque chapitre, fournit une explication relativement détaillée permettant aux étudiants de comprendre d'abord le contenu, puis de mener des expériences.
Chaque chapitre est associé à une vidéo et un laboratoire virtuel est mis en place, vous permettant ainsi de réaliser des expériences tout en regardant la vidéo.
De plus, les questions et références à la fin de chaque chapitre permettent une étude plus approfondie.
- Vous pouvez consulter un aperçu du contenu du livre.
Aperçu
indice
Préface 0
PARTIE 1 Biochimie 1
CHAPITRE 1 Préparation des solutions tampons et titrage des acides aminés 3
01 pH et solution tampon 4
CHAPITRE 2 Analyse qualitative et quantitative des acides aminés et des protéines 15
01 Méthodes de détermination de la concentration protéique 16
02 Séparation et analyse qualitative des acides aminés 27
CHAPITRE 3 Surexpression des protéines et chromatographie 37
01 Récolte de cellules et de protéines 38
02 Surexpression et purification des protéines 41
03 Purification de la Taq polymérase 51
04 Purification des protéines par chromatographie d'affinité MBP-Taq 60
05 Chromatographie d'exclusion stérique (chromatographie par filtration sur gel) 64
CHAPITRE 4 Activité et cinétique enzymatiques 73
01 Absorptiométrie 74
02 Cinétique enzymatique 81
CHAPITRE 5 : Extraction et analyse qualitative des lipides 93
01 Extraction et analyse qualitative des lipides à partir de tissus animaux et végétaux 94
CHAPITRE 6 Séparation et quantification des glucides 107
01 Isolement et analyse qualitative des glucides du tissu hépatique 108
CHAPITRE 7 SDS-PAGE et Western Blot 117
01 FDS-PAGE 118
02 Coloration au bleu de Coomassie 127
03 Analyse par Western Blot 131
CHAPITRE 8 Isolement et analyse des extraits protéiques intracellulaires 143
01 Préparation du lysat cellulaire 144
02 Test du gène rapporteur/ Test BCA 151
CHAPITRE 9 Empreintes peptidiques 157
01 Empreinte peptidique de masse I 158
02 Empreintes digitales peptidiques de masse II 169
PARTIE 2 Biologie moléculaire 189
CHAPITRE 10 Manipulation et transformation de l'ADN plasmidique 191
01 Électrophorèse sur gel d'agarose/enzyme de restriction/ligase 192
02 Cartographie de restriction et transformation de l'ADN plasmidique circulaire 211
03 Préparation de l'ADN plasmidique 221
04 Préparation à l'échelle moyenne 229
05 Mesure de l'efficacité de transformation des bactéries compétentes 241
CHAPITRE 11 Transcription inverse et réactions PCR 245
01 PCR (Réaction en chaîne par polymérase) 246
02 Analyse des changements d'expression génique par PCR en temps réel 250
03 Mutagenèse par PCR 255
04 Analyse par réaction en chaîne par polymérase après transcription inverse 262
CHAPITRE 12 Transfection de cellules animales et végétales supérieures 273
01 Culture de cellules de mammifères 274
02 Transfection sur des cellules de mammifères 279
03 Transfection de cellules animales à l'aide de chlorure de calcium (CaCl2) 284
04 Transfection de cellules animales à l'aide de liposomes 289
05 Transformation de cellules protoplastiques à l'aide de PEG (polyéthylène glycol) 295
CHAPITRE 13 Isolement de l'ARN et de l'ADN génomique eucaryotes 303
01 Isolement de l'ADN génomique à partir de cellules cultivées en monocouche 304
02 Isolement de l'ADN génomique à partir de tissu de queue de rat 311
03 Isolement de l'ADN génomique végétal 319
04 Isolement de l'ARN total à partir de plantes à l'aide de TRIzol 325
05 Isolement de l'ARN à partir de cellules monocouches à l'aide du réactif TRIzol 332
CHAPITRE 14 Isolement et analyse cellulaire 339
01 Test de cytotoxicité (test MTT) 340
02 Isolement, coloration et cytométrie de flux des cellules immunitaires de la rate de souris 344
03 Isolement des cellules immunitaires du sang de souris par centrifugation 352
Recherche 365
PARTIE 1 Biochimie 1
CHAPITRE 1 Préparation des solutions tampons et titrage des acides aminés 3
01 pH et solution tampon 4
CHAPITRE 2 Analyse qualitative et quantitative des acides aminés et des protéines 15
01 Méthodes de détermination de la concentration protéique 16
02 Séparation et analyse qualitative des acides aminés 27
CHAPITRE 3 Surexpression des protéines et chromatographie 37
01 Récolte de cellules et de protéines 38
02 Surexpression et purification des protéines 41
03 Purification de la Taq polymérase 51
04 Purification des protéines par chromatographie d'affinité MBP-Taq 60
05 Chromatographie d'exclusion stérique (chromatographie par filtration sur gel) 64
CHAPITRE 4 Activité et cinétique enzymatiques 73
01 Absorptiométrie 74
02 Cinétique enzymatique 81
CHAPITRE 5 : Extraction et analyse qualitative des lipides 93
01 Extraction et analyse qualitative des lipides à partir de tissus animaux et végétaux 94
CHAPITRE 6 Séparation et quantification des glucides 107
01 Isolement et analyse qualitative des glucides du tissu hépatique 108
CHAPITRE 7 SDS-PAGE et Western Blot 117
01 FDS-PAGE 118
02 Coloration au bleu de Coomassie 127
03 Analyse par Western Blot 131
CHAPITRE 8 Isolement et analyse des extraits protéiques intracellulaires 143
01 Préparation du lysat cellulaire 144
02 Test du gène rapporteur/ Test BCA 151
CHAPITRE 9 Empreintes peptidiques 157
01 Empreinte peptidique de masse I 158
02 Empreintes digitales peptidiques de masse II 169
PARTIE 2 Biologie moléculaire 189
CHAPITRE 10 Manipulation et transformation de l'ADN plasmidique 191
01 Électrophorèse sur gel d'agarose/enzyme de restriction/ligase 192
02 Cartographie de restriction et transformation de l'ADN plasmidique circulaire 211
03 Préparation de l'ADN plasmidique 221
04 Préparation à l'échelle moyenne 229
05 Mesure de l'efficacité de transformation des bactéries compétentes 241
CHAPITRE 11 Transcription inverse et réactions PCR 245
01 PCR (Réaction en chaîne par polymérase) 246
02 Analyse des changements d'expression génique par PCR en temps réel 250
03 Mutagenèse par PCR 255
04 Analyse par réaction en chaîne par polymérase après transcription inverse 262
CHAPITRE 12 Transfection de cellules animales et végétales supérieures 273
01 Culture de cellules de mammifères 274
02 Transfection sur des cellules de mammifères 279
03 Transfection de cellules animales à l'aide de chlorure de calcium (CaCl2) 284
04 Transfection de cellules animales à l'aide de liposomes 289
05 Transformation de cellules protoplastiques à l'aide de PEG (polyéthylène glycol) 295
CHAPITRE 13 Isolement de l'ARN et de l'ADN génomique eucaryotes 303
01 Isolement de l'ADN génomique à partir de cellules cultivées en monocouche 304
02 Isolement de l'ADN génomique à partir de tissu de queue de rat 311
03 Isolement de l'ADN génomique végétal 319
04 Isolement de l'ARN total à partir de plantes à l'aide de TRIzol 325
05 Isolement de l'ARN à partir de cellules monocouches à l'aide du réactif TRIzol 332
CHAPITRE 14 Isolement et analyse cellulaire 339
01 Test de cytotoxicité (test MTT) 340
02 Isolement, coloration et cytométrie de flux des cellules immunitaires de la rate de souris 344
03 Isolement des cellules immunitaires du sang de souris par centrifugation 352
Recherche 365
Image détaillée
SPÉCIFICATIONS DES PRODUITS
- Date de publication : 4 mars 2019
- Format : Guide de reliure Springbook
- Nombre de pages, poids, dimensions : 384 pages | 215 × 275 × 30 mm
- ISBN13 : 9791159431333
- ISBN10 : 1159431337
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